中药学论文_黄芪甲苷上调miR-199a-5p表达-脑与神经疾病杂志

一、稿件要求： 1、稿件内容应该是与某一计算机类具体产品紧密相关的新闻评论、购买体验、性能详析等文章。要求稿件论点中立，论述详实，能够对读者的购买起到指导作用。文章体裁不限，字数不限。 2、稿件建议采用纯文本格式(*.txt)。如果是文本文件，请注明插图位置。插图应清晰可辨，可保存为*.jpg、*.gif格式。如使用word等编辑的文本，建议不要将图片直接嵌在word文件中，而将插图另存，并注明插图位置。 3、如果用电子邮件投稿，最好压缩后发送。 4、请使用中文的标点符号。例如句号为。而不是.。 5、来稿请注明作者署名(真实姓名、笔名)、详细地址、邮编、联系电话、E-mail地址等，以便联系。 6、我们保留对稿件的增删权。 7、我们对有一稿多投、剽窃或抄袭行为者，将保留追究由此引起的法律、经济责任的权利。二、投稿方式： 1、请使用电子邮件方式投递稿件。 2、编译的稿件，请注明出处并附带原文。 3、请按稿件内容投递到相关编辑信箱三、稿件著作权： 1、投稿人保证其向我方所投之作品是其本人或与他人合作创作之成果，或对所投作品拥有合法的著作权，无第三人对其作品提出可成立之权利主张。 2、投稿人保证向我方所投之稿件，尚未在任何媒体上发表。 3、投稿人保证其作品不含有违反宪法、法律及损害社会公共利益之内容。 4、投稿人向我方所投之作品不得同时向第三方投送，即不允许一稿多投。若投稿人有违反该款约定的行为，则我方有权不向投稿人支付报酬。但我方在收到投稿人所投作品10日内未作出采用通知的除外。 5、投稿人授予我方享有作品专有使用权的方式包括但不限于：通过网络向公众传播、复制、摘编、表演、播放、展览、发行、摄制电影、电视、录像制品、录制录音制品、制作数字化制品、改编、翻译、注释、编辑，以及出版、许可其他媒体、网站及单位转载、摘编、播放、录制、翻译、注释、编辑、改编、摄制。 6、投稿人委托我方声明，未经我方许可，任何网站、媒体、组织不得转载、摘编其作品。

中药学论文_黄芪甲苷上调miR-199a-5p表达

作者:

关键词:

摘要：

文章目录

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 动物

1.1.2 主要试剂

1.1.3 主要仪器

1.2 方法

1.2.1 神经干细胞分离、原代培养与传代

1.2.2 神经干细胞鉴定

1.2.2. 1 神经干细胞标志物检测

1.2.2. 2 神经干细胞增殖特性检测

1.2.2. 3 神经干细胞分化能力检测

1.2.3 OGD/R模型的建立

1.2.4 细胞分组与干预措施

1.2.5 细胞活性检测

1.2.6 AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测神经干细胞凋亡

1.2.7 Real-time qPCR检测miR-199a-5p基因表达

1.2.8 免疫印迹法检测caspase-3、cleaved caspase-3蛋白表达

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 神经干细胞的体外培养与鉴定

2.2 黄芪甲苷促进OGD/R损伤的神经干细胞存活

2.3 黄芪甲苷抑制OGD/R诱导的神经干细胞凋亡

2.4 黄芪甲苷通过上调miR-199a-5p促进OGD/R损伤的神经干细胞存活

2.5 黄芪甲苷通过上调miR-199a-5p抑制OGD/R诱导的神经干细胞凋亡

2.6 黄芪甲苷下调OGD/R损伤的神经干细胞cleaved caspase-3蛋白表达

3 讨论

文章摘要:[目的]探讨黄芪甲苷是否通过上调miR-199a-5p抑制氧糖剥夺/再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）诱导的神经干细胞凋亡。[方法]分离14 d胎龄SD大鼠的大脑皮层神经干细胞并鉴定，随机分为正常对照组、模型对照组、黄芪甲苷组、黄芪甲苷+miR-199a-5p拮抗剂组（拮抗剂组）和黄芪甲苷+miR-199a-5p拮抗剂对照组（拮抗剂对照组）。除正常对照组外，其余组神经干细胞先行氧糖剥夺8 h，再灌注72 h，拮抗剂组和拮抗剂对照组分别采用脂质体2000转染miR-199a-5p拮抗剂和拮抗剂对照。采用2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2,4-二磺酸苯）-2H-四唑单钠盐[2-（2-methoxy-4-nitrophenyl）-3-（4-nitrophenyl）-5-（2,4-disulfonic acid benzene）-2H-tetrazole monosodium salt,CCK-8]法检测神经干细胞活性，异硫氰酸荧光素标记磷脂结合蛋白/碘化丙啶（Annexin-fluorescein isothiocyanate isomer/propidium iodide,AnnexinⅤ-FITC/PI）双染法检测神经干细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR）检测miR-199a-5p表达，免疫印迹法检测切割型半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved caspase-3）和半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）蛋白表达。[结果]分离培养的神经干细胞纯度为98.41%，黄芪甲苷能够提高OGD/R损伤的神经干细胞存活率，其中50μmol·L^-1黄芪甲苷效果最佳（P<0.01）；与模型对照组比较，50μmol·L^-1黄芪甲苷能抑制OGD/R损伤的神经干细胞凋亡（P<0.01），上调miR-199a-5p表达（P<0.01），下调cleaved caspase-3蛋白表达（P<0.01），而miR-199a-5p拮抗剂能显著逆转上述效应（P<0.01）。[结论]黄芪甲苷能够促进OGD/R损伤的神经干细胞存活，抑制其凋亡，作用机制可能与其上调miR-199a-5p表达，抑制cleaved caspase-3蛋白表达有关。

文章关键词:

论文作者:李钰丁文倩李琳许家栋方燕杨琰胡小伟储利胜

作者单位:浙江中医药大学基础医学院

论文DOI:10.16466/j.issn1005-5509.2022.05.001

论文分类号:R285

文章来源：《脑与神经疾病杂志》网址: http://www.nysjjb.cn/qikandaodu/2022/0711/641.html